2025-09-09 11:07:43
英瀚斯生物深入了解客戶的具體需求,并制定了經過測試的標準操作程序(SOP),以優化免疫組化實驗的各個方面,包括組織固定方法、抗原活化條件、抗體滴度選擇、孵育時間和洗滌條件等。組織切片的制備:客戶可以提供新鮮組織,由我們負責進行組織固定和石蠟包埋;也可以提供冷凍或石蠟包埋的組織或細胞樣品進行分析。抗體的選擇:客戶可以自行提供檢測所需的一抗,或者由我們從現有的抗體中篩選合適的抗體。檢測所需的二抗由我們提供。特殊染色技術用于檢測特定細胞成分。南京TTC染色公司
?病理染色流程之組織脫水:樣品經過固定后,將通過一系列的酒精梯度逐步脫水,然后用二甲苯透明化,***浸入石蠟中。這一系列步驟旨在去除組織中的水分,使其變得堅硬并易于切片。?石蠟包埋區:脫水后的組織被包裹在石蠟中,形成一個堅硬的塊狀物,便于后續的切片操作。?切片制作區:使用石蠟切片機(如Leica HistoCore MULTICUT)將包埋好的組織切成薄片(通常為4-5微米厚),以便于進一步的染色和觀察。
英瀚斯專業病理實驗平臺,從取材固定包埋脫水切片染色拍照分析,一站式完成。 南京番紅-固綠染色外包剛果紅染色用于檢測淀粉樣蛋白沉積。
常見染色方法有:蘇木精-伊紅染色(H&E染色)?用途:是**常用的組織學染色方法,適用于幾乎所有類型的組織。?結果:細胞核被蘇木精染成藍色或紫色,細胞質被伊紅染成粉紅色。Masson三色染色?用途:用于顯示膠原纖維、肌纖維和細胞核。?結果:膠原纖維呈藍色,肌纖維呈紅色,細胞核呈藍黑色。天狼星紅染色?用途:用于顯示膠原纖維,在偏振光下區分不同類型的膠原纖維。?結果:I型膠原纖維呈亮黃色或橙紅色,III型膠原纖維呈綠色或黃色。PAS染色(過碘酸雪夫染色)?用途:用于檢測糖原和其他多糖物質。?結果:糖原和其他多糖物質呈紫紅色或粉紅色。銀染技術?用途:用于顯示神經纖維、網狀纖維等。?結果:神經纖維和網狀纖維呈黑色或深棕色。免疫組化染色?用途:用于檢測和定位特定的蛋白質或抗原。?結果:特定的蛋白質或抗原被標記并顯現出特定的顏色。
2. 病變特征的識別:?通過特定的染色方法,可以識別出不同類型的病變特征。例如,Masson三色染色可以區分膠原纖維(藍色)、肌纖維(紅色)和細胞核(藍黑色),這對于評估心肌梗死、肺纖維化、肝纖維化等疾病模型中的纖維化程度非常有用。3. 炎癥反應的評估:?某些染色方法可以用來檢測炎癥反應。例如,PAS(過碘酸雪夫染色)可以顯示糖原和其他多糖物質,有助于評估炎癥過程中糖原的沉積情況。4. 細胞增殖和凋亡的分析:?免疫組化染色如Ki-67染色可以用來標記增殖細胞,TUNEL染色可以用來檢測細胞凋亡。這些染色方法對于評估**模型或其他涉及細胞增殖和死亡的模型非常重要。TUNEL染色用于檢測細胞凋亡。
TUNEL染色的染色步驟1. 樣品準備:?將組織切片或細胞固定在載玻片上,通常使用4%多聚甲醛或其他固定劑。?進行蛋白酶K處理,以增加細胞膜的通透性,使TdT能夠進入細胞并接觸DNA。2. TUNEL反應:?準備TUNEL反應混合液,包括TdT酶和標記的dUTP(如熒光素或生物素標記的dUTP)。?將反應混合液滴加到樣品上,在適當的溫度下孵育一定時間(通常為1小時左右)。3. 洗滌:?用PBS緩沖液或其他適當的洗滌液清洗樣品,去除未結合的dUTP。4. 信號檢測:?如果使用的是熒光素標記的dUTP,可以直接在熒光顯微鏡下觀察。?如果使用的是生物素標記的dUTP,則需要進一步與鏈霉親和素-熒光素復合物或其他顯色試劑結合,然后在顯微鏡下觀察。Nissl染色用于顯示神經元的尼氏體。南京Warthin-Starry銀染色外包
病理染色切片用于顯微鏡下觀察組織結構。南京TTC染色公司
病理切片染色實驗的可靠性依賴于嚴格的質量控制。研究人員應當設置陽性對照和陰性對照,以驗證染色的特異性和可靠性。陽性對照是已知表達目標抗原的組織,陰性對照則是省略一抗或使用同型對照抗體的切片。此外,重復性檢測和標準化操作也十分關鍵。尤其在臨床病理中,染色結果直接影響診斷,因此必須有統一的操作規范和評價標準。例如,IHC 中的 HER2 染色評分就是基于統一標準進行的,以保證結果的可比性和臨床應用價值。專業病理切片染色拍照平臺。南京TTC染色公司